城市在恢复平静后，大反派重新召集旧部卷土重来，并勾结外星恶势力朗格试图称霸地球，忍者神龟莱昂纳多（皮特·普劳泽克PetePloszek饰）、拉斐尔（阿兰·里奇森AlanRitchson饰）、多纳泰罗（杰瑞米·霍华德JeremyHoward饰）和米开朗基罗（诺尔·费舍NoelFisher饰）与女记者艾蓓丽尔·奥尼尔（梅根·福克斯MeganFox饰）、韦恩·芬威克（威尔·阿奈特WillArnett饰），及面具义警凯西·琼斯（斯蒂芬·阿梅尔StephenAmell饰）并肩作战打击恶徒。在史莱德（布莱恩·泰BrianTee饰）逃脱拘留后，他与疯狂的科学家巴克斯特斯·托克曼（泰勒·派瑞TylerPerry饰）及其两个笨拙的左膀右臂猪面和牛头联合，发布了一个控制世界的恶魔计划。在神龟们与史莱德及其同伙对抗的同时，他们发现自己正面临着一个更邪恶的力量大反派格朗，神龟们面对的将是宇宙级的强大对手。
托尼·托德 丽贝卡·罗梅恩 罗莎里奥·道森 雷恩·威尔森 卡米拉·卢丁顿 泰莎·法米加 杰瑞·奥康奈尔 谢默·摩尔 克里斯托弗·戈勒姆 马特·瑞安 杰森·奥玛拉 连姆·麦肯泰尔 约翰·迪·马吉欧 海登·瓦尔希 罗杰·R.克劳斯 雷·蔡斯 斯图尔特·艾伦 萨奇·阿莱西奥
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